药物分析第(7)章
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admin
2019-08-13 00:44

  第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析 1 第一节 结构与性质 ? 基本结构 R1 CH OH CH R3 NH R2 ? 肾上腺素 CH HO OH OH CH H NH CH3 2 第一节 结构与性质 R1 HO HO HO HO R2 -CH3 R3 HX 名称 肾上腺素 -H -H -H -H -H CH(OH)COOH CH(OH)COOH -H -H -CH(CH3)2 HO HO HO HO HO HCl HCl HCl 重酒石酸 去甲肾上腺素 盐酸去氧肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素 盐酸多巴胺 3 -H 第一节 结构与性质 ? 性质 1. 弱碱性:烃氨基侧链,仲胺氮。 2. 酚羟基特性:邻苯二酚或酚羟基结构。 3. 旋光性:手性碳原子。 4. 紫外吸收特性:苯环,254nm为中心红移 或蓝移。 4 第二节 鉴别试验 一、 三氯化铁反应 绿色,加入碱液显紫红色。 二、甲醛-硫酸反应 酚羟基的本类药物,与甲醛在硫酸中反应,形 成具有醌式结构的有色物。 肾上腺素 红色 盐酸异丙肾上腺素 棕色至暗紫色 重酒石酸去甲肾上腺素 淡红色 盐酸去氧肾上腺素 玫瑰红→橙红→深棕红 5 第二节 鉴别试验 ? 与三氯化铁反应、与甲醛-硫酸反应 药物 肾上腺素 三氯化铁 0.1mol/L盐酸液中显翠绿色, 加氨试液显紫色,紫红色 甲醛-硫酸 红色 淡红色 重酒石酸去甲肾上腺素 翠绿色,加碳酸氢钠试液显蓝 色,红色 盐酸去氧肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素 盐酸多巴胺 紫色 玫瑰红,橙红,深棕 红 深绿色,滴加新制5%碳酸氢钠 棕色,暗紫色 液,显蓝紫色,红色 墨绿色,滴加1%氨溶液,显紫 红色 6 肾上腺素 ? 【鉴别】 (1) 取本品约2mg,加盐酸溶 液(9→1000)2~3滴溶解后,加水2ml与三 氯化铁试液1滴,即显翠绿色;再加氨试液 1滴,即变紫色,最后变成紫红色。 7 盐酸异丙肾上腺素 ? 【鉴别】 (1) 取本品20mg,加水2ml溶解 后,加三氯化铁试液2滴,即显深绿色;滴加 新制的5%碳酸氢钠溶液,即变蓝色,然后变 成红色。 8 重酒石酸去甲肾上腺素 ? 【鉴别】 (1) 取本品约10mg,加水1ml 溶解后,加三氯化铁试液1滴,振摇,即显 翠绿色;再缓缓加碳酸氢钠试液,即显蓝色, 最后变成红色。 9 盐酸去氧肾上腺素 ? 【鉴别】 (2) 取本品约10mg,加水 1ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,即显紫 色。 10 盐酸多巴胺 ? 【鉴别】 (1) 取本品10mg,加水 1ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,溶液显 墨绿色;滴加1%氨溶液,即转变成紫红色。 11 盐酸甲氧明 ? 【鉴别】 (1) 取本品约1mg,加甲醛硫 酸试液3滴,即显紫色,渐变为棕色,最后 成绿色。 12 硫酸沙丁胺醇 ? 【鉴别】 (1) 取本品约20mg,加水 2ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,振摇, 溶液显紫色;加碳酸氢钠试液即生成橙黄 色浑浊。 13 第二节 鉴别试验 三、 氧化还原反应 放置 肾上腺素 pH3.5 I2 pH6.5 I2 肾上腺素红 异丙肾上腺素红 棕色多聚体 淡红色 盐酸异丙肾 重酒石酸去甲肾 硫代硫酸钠 几乎不被氧化 三者皆氧化为红色 14 第二节 鉴别试验 利用此反应区别: 甲:pH3.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液 乙:pH6.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液 肾上腺素:均为红色 重酒石酸去甲肾上腺素:甲无色、乙红色 15 肾上腺素 ? 【鉴别】 (2) 取本品10mg,加盐酸溶 液(9→1000)2ml溶解后,加过氧化氢试液 10滴,煮沸,即显血红色。 16 盐酸异丙肾上腺素 ? 【鉴别】 (2) 取本品10mg,加水10ml溶 解后,取溶液2ml,加盐酸滴定液 (0.1mol/L)0.1ml,再加0.1mol/L碘溶液1ml, 放置5分钟,加0.1mol/L硫代硫酸钠溶液4ml, 即显淡红色。 17 重酒石酸去甲肾上腺素 ? 【鉴别】 (2) 取本品约1mg,加酒石 酸氢钾的饱和溶液10ml溶解,加碘试液1ml, 放置5分钟后,加硫代硫酸钠试液2ml,溶 液为无色或仅显微红色或淡紫色(与肾上腺 素或异丙肾上腺素的区别)。 18 第二节 鉴别试验 四、 双缩脲反应 是鉴别芳环氨基醇的特殊反应;可用于盐酸麻黄 碱、盐酸去氧肾上腺素鉴别: D + CuSO4 + NaOH 显蓝紫色 +,醚层(紫红色)水层(蓝色) 盐酸麻黄碱 +,醚层(不显色) 盐酸去氧肾上腺素 19 盐酸去氧肾上腺素 ? 【鉴别】 (1) 取本品约10mg,加水 1ml溶解后,加硫酸铜试液1滴与氢氧化钠 试液1ml,摇匀,即显紫色;加1ml振 摇,层应不显色。 20 盐酸麻黄碱 ? 【鉴别】 (1) 取本品约10mg,加水1ml 溶解后,加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠 溶液1ml,即显蓝紫色;加1ml,振摇 后,放置,层即显紫红色,水层变成 蓝色。 21 第二节 鉴别试验 五、 Rimini试验 ? 脂肪族伯胺的专属反应(间羟胺) ? 供试品加水溶解,加亚硝基铁氰化钠试液、 丙酮、碳酸氢钠,加热,显红紫色。 ? 丙酮必须不含甲醛成分 22 重酒石酸间羟胺 ? (2) 取本品约5mg,加水0.5ml使溶解, 加亚硝基铁氰化钠试液2滴、丙酮2滴与碳 酸氢钠0.2g,在60℃的水浴中加热1分钟, 即显红紫色。 23 第二节 鉴别试验 六、紫外光谱 七、红外光谱 24 盐酸异丙肾上腺素 ? (3) 取本品,加水制成每1ml中含50μg的 溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A) 测定,在280nm的波长处有最大吸收,吸 光度约为0.50。 ? (4) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集349图)一致。 25 盐酸多巴胺 ? (2) 取本品,加0.5%硫酸溶液制成每 1ml中约含30μg的溶液,照紫外-可见分光 光度法(附录Ⅳ A)测定,在280nm的波长 处有最大吸收。 ? (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图 谱(光谱集345图)一致。 26 硫酸特布他林 ? (2) 取本品,用0.1mol/L盐酸溶液制成 每1ml中含0.1mg的溶液,照紫外-可见分 光光度法(附录Ⅳ A)测定,在276nm的波 长处有最大吸收。 ? (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集668图)一致,如不一致时, 再取本品适量,加无醛甲醇使溶解,置水 浴蒸干后测定。 27 重酒石酸间羟胺 ? (3) 取本品,加水制成每1ml中约含 0.1mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附 录Ⅳ A)测定,在272nm的波长处有最大 吸收。 ? (4) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集294图)一致。 28 盐酸甲氧明 ? 吸收系数 取本品,精密称定,加水 溶解并定量稀释制成每1ml中约含30μg的 溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A), 在290nm的波长处测定吸光度,吸收系数 (E1% 1cm)为133~141。 ? (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图 谱(光谱集329图)一致。 29 盐酸克仑特罗 ? (2) 取本品,加0.1mol/L盐酸溶液制成 每1ml中含30μg的溶液,照紫外-可见分光光 度法(附录Ⅳ A)测定,在243nm与296nm的 波长处有最大吸收。 ? (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的 图谱(光谱集351图)一致。 30 硫酸沙丁胺醇 ? (3) 取本品,加水溶解并稀释制成每 1ml中约含80μg的溶液,照紫外-可见分光 光度法(附录Ⅳ A)测定,在276nm的波长 处有最大吸收。 ? (4) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集486图)一致。 31 第三节 一、酮体杂质检查 特殊杂质与检查 氢化不完全,引入酮体 酮体:310nm有最大吸收 药物:此波长下无吸收 方法:2.0mg/ml样品液→310nm处测定 规定A≯0.05 ( E 1% 1cm =453,限量) 32 肾上腺素 ? 【检查】 酮体 取本品,加盐酸溶液 (9→2000)制成每1ml中含2.0mg的溶液, 照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A),在 310nm的波长处测定,吸光度不得过0.05。 33 重酒石酸去甲肾上腺素 ? 【检查】 酮体 取本品,加水溶解并 稀释制成每1ml中约含2.0mg的溶液,照紫 外-可见分光光度法(附录Ⅳ A),在310nm 的波长处测定,吸光度不得过0.05。 34 盐酸去氧肾上腺素 ? 【检查】 酮体 取本品2.0g,置100ml 量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀, 取10ml,置50ml量瓶中,用0.01mol/L盐 酸溶液稀释至刻度,摇匀。照紫外-可见分 光光度法(附录Ⅳ A),在310nm的波长处 测定吸光度,不得大于0.20。 35 盐酸甲氧明 ? 【检查】 酮胺 取本品,加水制成每 1ml中含1.5mg的溶液,照紫外-可见分光 光度法(附录Ⅳ A),在347nm的波长处测 定,吸光度不得过0.06。 36 第三节 二、光学纯度检查 特殊杂质与检查 ? 检查对映体控制药品质量 如肾上腺素在盐酸溶液中,样品浓度 20mg/ml,比旋度为-50.0°~ - 53.5° 对映体分离采用色谱法和电泳法。 37 重酒石酸去甲肾上腺素 ? 比旋度 取本品,精密称定,加水溶解 并定量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液, 依法测定(附录Ⅵ E),比旋度为-10.0°至 -12.0°。 38 盐酸去氧肾上腺素 ? 比旋度 取本品,精密称定,加水溶解 并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液, 依法测定(附录Ⅵ E),比旋度为-42°至47°。 39 硫酸沙丁胺醇 ? 旋光度 取本品约0.25g,精密称定,置 25ml量瓶中,加水适量使溶解,用水稀释 至刻度,摇匀,依法测定(附录Ⅵ E),旋 光度为-0.10°至+0.10°。 40 第三节 特殊杂质与检查 三、有关物质的检查 有关物质 1. 盐酸去氧肾上腺素 供试液:20mg/ml甲醇液 对照液:0.1mg/ml甲醇液 层析板:硅胶G板 点样:各点10μl 展开剂:异丙醇-氯仿-浓氨(80∶5∶15) 显色剂:重氮苯磺酸试液 规定:杂斑颜色与对照主斑比较不得更深 41 盐酸去氧肾上腺素 ? 有关物质 避光操作。取本品,加甲醇溶解 并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液, 作为供试品溶液;精密量取适量,加甲醇稀 释成每1ml中含约0.10mg的溶液,作为对照 溶液。照薄层色谱法(附录Ⅴ B)试验,吸取 上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G 薄层板上,以异丙醇-三氯甲烷-浓氨溶液 (80:5:15)为展开剂,展开,晾干,喷以重氮 苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑 点,与对照溶液的主斑点比较,颜色不得更 深(0.5%)。 42 第三节 特殊杂质与检查 2. 肾上腺素 供试液:1mg/ml 液 对照液:0.002ml/ml液 固定相:十八烷基硅烷键合硅胶 流动相:硫酸氢四甲基铵溶液 波长:205nm 理论塔板数按去甲肾上腺素峰计算不低于3000 43 肾上腺素 ? 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验,用 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以硫酸氢四甲基 铵溶液(取硫酸氢四甲基铵4.0g,庚烷磺酸钠1.1g, 0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液2ml,用水溶解并 稀释至950ml)-甲醇(95:5)(用1mol/L氢氧化钠溶液 调节pH值至3.5)为流动相;流速为每分钟2ml,检 测波长为205nm。供试品溶液色谱图中如有杂质峰, 单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2 %),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积 的2.5倍(0.5%)。 44 盐酸异丙肾上腺素 ? 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验, 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸溶液 (取磷酸11.5g,用水溶解并稀释至1000ml)-甲醇 (95:5)为流动相;检测波长为280nm。取系统适用 性试验溶液20μl,注入液相色谱仪,间羟异丙肾 上腺素峰与盐酸异丙肾上腺素峰之间的分离度应 大于3.0,盐酸异丙肾上腺素峰的信噪比应大于3。 记录色谱图至主成分峰保留时间的7倍。供试品溶 液的色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得 大于对照溶液的主峰面积(0.5%),各杂质峰面积 的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0%)。 45 重酒石酸去甲肾上腺素 ? 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验。用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05%庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节 pH值至2.2)为流动相A;乙腈-0.05%庚烷磺酸钠溶液(1:1)(用 磷酸调节pH值至2.4)为流动相B,照下表进行梯度洗脱;检测 波长为280nm;流速为每分钟1.5ml。主成分峰的保留时间约 为11分钟,主成分峰后应出现一个未知降解产物峰与去甲肾上 腺酮峰,去甲肾上腺酮峰的相对保留时间约为1.3,理论板数 按去甲肾上腺素峰计算不低于5000,主成分峰与相邻杂质峰之 间的分离度应符合要求。供试品溶液的色谱图中如有与去甲肾 上腺酮峰保留时间一致的色谱峰,其峰面积乘以0.3后不得大 于对照溶液主峰面积的1/3(0.1%),其他单个杂质峰面积不得 大于对照溶液主峰面积的1/3(0.1%);杂质总量不得过0.3%。 供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积1/6倍的峰可 忽略不计。 46 盐酸多巴胺 ? 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验, 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以 0.005mol/L十二烷基硫酸钠-乙腈-冰醋酸0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠(700:300:10:2)为流 动相;检测波长为280nm。取系统适用性试验溶 液20μl,注入液相色谱仪,盐酸多巴胺峰和4-乙 基邻苯二酚峰的分离度应大于3.0。记录色谱图至 盐酸多巴胺峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱 图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照 溶液主峰面积的0.5倍(0.5%),各杂质峰面积的和 不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%)。 47 第四节 含量测定 一、非水滴定法 非水滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法,主 要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸 盐或有机酸盐,以及有机酸的碱金属盐类药物的 含量,也可用测定某些有机弱酸的含量。 酸性溶剂:有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强 其相对碱度。常用 冰醋酸 碱性溶剂 与酸性相反 二甲基甲酰胺 两性溶剂:兼有酸、碱两种性能,甲醇 惰性溶剂:没有酸、碱性,苯、氯仿 48 一、非水滴定法 ?在水中碱性较弱,不能顺利地进行中和滴 定(滴定突跃不明显,难以判断滴定终点)。 ?在酸性非水介质中(如冰HAc中),则能显 示出较强的碱性,滴定突跃增大,可以顺利 地进行中和滴定。 49 一、非水滴定法 (一) 反应原理 B+HAC→BH++ACHClO4+HAC→H2AC++ClO4- H2AC++AC-→2HAC 总式:B+HClO4→BH+ClO4- BH+A-+HClO4→BH+ClO4-+HA 置换滴定:用强酸(HClO4)置换出与生物 碱结合的较弱的酸(HA) 50 一、非水滴定法 (二)一般方法 供试品:消耗标准液8ml计算 溶剂: gHAc,用量10~30ml 滴定剂: 0.1mol/L HClO4/无水gHAc 溶液 指示液结晶紫1~2滴 终点颜色以电位滴定时的突跃点为准,同时做空白, 加入醋酐应防止氨基被乙酰化。 51 一、非水滴定法 (三)讨论 1. 适用范围 pKb8的有机弱碱性药物及其盐类 溶媒的选择 pKb8~10:gHAC pKb10~12:gHAC+AC2O pKb12:AC2O 2(CH3CO)2O (CH3CO)3O+ + CH3COO52 一、非水滴定法 2. 酸根的影响 HClO4HBrH2SO4HClHNO3 1) 氢卤酸盐 B?HX + HClO4 →BHClO4 + HX 释放出的HX影响滴定,加HgAC2排除 2[B]HX+HgAC2→2[B]?HAC+HgX2 HgAC2量:过量1~3倍 53 一、非水滴定法 2)硝酸盐 ? ? HNO3在gHAc中为弱酸,不影响滴定突跃 HNO3具有氧化性,可使指示剂变色,应采用电位法 指示终点或将HNO3破坏分解后再进行测定。 ? 硝酸士的宁 3)磷酸盐与有机酸盐 常规方法直接滴定 54 一、非水滴定法 4)硫酸盐 ? 在水中硫酸是二元酸,能解离出两个氢离子 ? 在冰醋酸中硫酸是一元酸,能够解离出一个 氢离子,即 H 2SO4 H ? ? ? HSO 4 ? 注意N原子碱性强弱,正确判断反应摩尔比 55 一、非水滴定法 3. 滴定剂的稳定性 水膨胀系数0.21?10-3/?C gHAc膨胀系数1.1?10-3/?C,且具挥发性。 测定与标定时温度不同,对浓度校正。 56 一、非水滴定法 N0 校正公式: N1 ? 1 ? 0.0011 (t1 ? t0 ) 其中: 0.0011:gHAc膨胀系数 t0、t1:标定、测定时温度 N0、N1:t0、t1对应的滴定液的浓度 注意: ?t1-t0?10?C或贮存30天 重新标定 57 一、非水滴定法 4. 终点指示方法 电位滴定和指示剂法 (1)结晶紫 Crystal Violet(CV) 紫→蓝紫→蓝绿→绿→黄 碱性区 酸性区 (2)孔雀绿:浅兰绿色→黄色 (3)α -奈酚苯甲醇:黄→绿 (4)喹哪啶红:红→无色 58 一、非水滴定法 5. 其他干扰 有机碱性药物经碱化处理,有机溶剂提 取分离出游离碱再测定。 gHAc和HClO4含有一定量的水分 排除方法: 费休氏(Fischer):准确测出水分 根据其含水量,加入计算量醋酐 同时:仪器干燥无水 59 肾上腺素 ? 【含量测定】 取本品约0.15g,精密 称定,加冰醋酸10ml,振摇溶解后,加结 晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液 (0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将滴定 的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定 液(0.1mol/L)相当于18.32mg的C9H13NO3。 60 盐酸异丙肾上腺素 ? 【含量测定】 取本品约0.15g,精密 称定,加冰醋酸30ml,微温使溶解,放冷, 加醋酸汞试液5ml与结晶紫指示液1滴,用 高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝色, 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高 氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于24.77mg的 C11H17NO3· HCl。 61 重酒石酸去甲肾上腺素 ? 【含量测定】 取本品0.2g.精密称 定,加冰醋酸10ml,振摇(必要时微温)溶 解后,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定 液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将滴 定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴 定液(0.1mol/L)相当于31.93mg的 C8H11NO3· C4H6O6。 62 盐酸多巴胺 ? 【含量测定】 取本品约0.15g,精密称定, 加冰醋酸25ml,煮沸使溶解,冷却至约 40℃,加醋酸汞试液5ml,放冷,加结晶紫 指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴 定至溶液显蓝绿色,并将滴定的结果用空 白试验校正。每1ml高氯酸滴定液 (0.1mol/L)相当于18.96mg的 C8H11NO2· HCl。 63 二、溴量法 重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素 ? 原理: Br CH OH OH CH2 NH CH3 CH + 3Br2 Br OH Br OH CH2 NH CH3 + 3HBr Br2 + 2KI 2KBr + I2 I2 +2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 64 溴量法 ? 测定方法 盐酸去氧肾上腺素(M=203.67) 水20ml 溴滴定液50ml 本品约0.1g 碘瓶中 0.05mol/L 溶解 精密称定 0.1129g 放置15min 碘化钾试液10ml 振摇 近终点时 加淀粉指示液 滴定至蓝色消失 15.33ml 65 盐酸5ml 密塞 硫代硫酸钠滴定液滴定 0.1mol/L 0.1015 密塞,振摇 空白试验 48.25ml 溴量法 讨 论: 1)0.05mol/LBr2标准液 3gKBrO3+15gKBr+H2O→1000ml KBrO3+5KBr+6HCl→3Br2+6KCl+3H2O 2)溴、碘易挥发,防止逸失 3)溴代物水中不溶,需加HAC、CHCl3或EtOH 4)溴过量2%为宜 5)空白试验 6)化学计量关系:1:6 1药物=3Br2=3I2=6Na2S2O3 66 盐酸去氧肾上腺素 ? 【含量测定】 取本品约0.1g,精密称定, 置碘瓶中,加水20ml使溶解,精密加溴滴 定液(0.05mol/L)50ml,再加盐酸5ml,立 即密塞,放置15分钟并时时振摇,注意微 开瓶塞,加碘化钾试液10ml,立即密塞, 振摇后,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴 定,至近终点时,加淀粉指示液,继续滴 定至蓝色消失,并将滴定的结果用空白试 验校正。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相当 于3.395mg的C9H13NO2· HCl。 67 重酒石酸间羟胺 ? 【含量测定】 取本品约0.1g,精密 称定,置碘瓶中,用水40ml使溶解,精密 加溴滴定液(0.05mol/L)40ml,再加盐酸 8ml,立即密塞,放置15分钟,注意微开瓶 塞,加碘化钾试液8ml,立即密塞,振摇, 用少量水冲洗碘瓶的瓶塞和瓶颈,加三氯 甲烷1ml,振摇,用硫代硫酸钠滴定液 (0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示 液,继续滴定至蓝色消失,并将滴定的结 果用空白试验校正。每1ml溴滴定液 (0.05mol/L)相当于5.288mg的 C9H13NO2· C4H6O6。 68 三、比色法 利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3+络合显 色,进行比色测定; 也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶 合显色,进行比色。 69 三、比色法 例如:盐酸克伦特罗栓的含量测定 [N2]+Cl Cl - N=N NHCH2CH2NH2 + Cl NHCH2CH2NH2 Cl Cl CH(OH)CH2NHC(CH3)3 N-(1-萘基)-乙二胺 CH(OH)CH2NHC(CH3)3 500nm比色测定 上述偶合剂可与HNO2显色,干扰比色测定,可先加氨基 磺酸铵分解过量的HNO2。 HNO2 + 2H2NSO3NH4 2N2 + (NH4)2SO4 + H2SO4 +H2O 70 盐酸克仑特罗栓 ? 【含量测定】 取本品20粒,精密称定,切成小片,精密 称取适量(约相当于盐酸克仑特罗0.36mg),置分液漏斗中, 加温热的三氯甲烷20ml使溶解。用盐酸溶液(9→100)振 摇提取3次(20ml、15ml、10m1),分取酸提取液,置 50ml量瓶中,用盐酸溶液(9→100)稀释至刻度,摇匀, 滤过,取续滤液,作为供试品溶液;另取盐酸克仑特罗对 照品适量,精密称定,加盐酸溶液(9→100)溶解并定量稀 释制成每1ml中含7.2μg的溶液,作为对照品溶液。精密 量取对照品溶液与供试品溶液各15ml,分别置25ml量瓶 中,各加盐酸溶液(9→100)5ml与0.1%亚硝酸钠溶液1ml, 摇匀,放置3分钟,各加0.5%氨基磺酸铵溶液1ml,摇匀, 时时振摇10分钟,再各加0.1%盐酸萘乙二胺溶液1ml, 摇匀,放置10分钟,用盐酸溶液(9→100)稀释至刻度,摇 匀,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A),在500nm的波 长处分别测定吸光度,计算,即得。 71 四、亚硝酸钠法 ? 盐酸克仑特罗:芳伯氨基 ? 与亚硝酸钠定量发生重氮化反应 ? 永停滴定 72 盐酸克仑特罗 ? 【含量测定】 取本品约0.25g,精密称定, 置100ml烧杯中,加盐酸溶液(1→2)25ml使 溶解,再加水25ml,照永停滴定法(附录Ⅶ A),用亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)滴定。 每1ml亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)相当于 15.68mg的C12H18Cl2N2O· HCl。 73 五、紫外分光光度法 ? 取代苯环——特征吸收 ? 制剂含量测定 ? 盐酸甲氧明注射液、重酒石酸间羟胺注射 液等。 74 重酒石酸间羟胺注射液 ? 【含量测定】 精密量取本品5ml(约相 当于间羟胺50mg),置50ml量瓶中,加水稀 释至刻度,摇匀;精密量取5ml,置100ml量 瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见 分光光度法(附录Ⅳ A),在272nm的波长处 测定吸光度,按C9H13NO2的吸收系数(E1% 1cm)为111计算,即得。 75 六、 HPLC法 高效分离、高灵敏度、高选择性 在本类药物及制剂的定量分析中广泛应用。 76 重酒石酸去甲肾上腺素注射液 ? 【含量测定】 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测 定。 ? 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂;以0.14%庚烷磺酸钠溶液甲醇(65:35)(用磷酸调节pH值至3.0±0.1)为流动 相;检测波长为280nm。理论板数按去甲肾上腺 素峰计算不低于3000。 ? 测定法 精密量取本品适量(约相当于重酒石 酸去甲肾上腺素4mg),置25ml量瓶中,加4%醋 酸溶液稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl,注入 液相色谱仪,记录色谱图;另取重酒石酸去甲肾 上腺素对照品适量,精密称定,加4%醋酸溶液制 成每1ml中含0.16mg的溶液,同法测定。按外标 法以峰面积计算,即得。 77 盐酸多巴胺注射液 ? 【含量测定】 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测 定。 ? 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂;以0.005mol/L十二烷基硫 酸钠-乙腈-冰醋酸-0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠 (700:300:10:2)为流动相;检测波长为280nm。 取盐酸多巴胺对照品与4-乙基邻苯二酚适量,加 流动相溶解并稀释制成每1ml中各约含6μg的混合 溶液,取20μl注入液相色谱仪。盐酸多巴胺峰和 4-乙基邻苯二酚峰的分离度应大于3.0。 ? 测定法 精密量取本品适量,用流动相定量 稀释制成每1ml中含盐酸多巴胺30μg的溶液,精 密量取20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图。另 取盐酸多巴胺对照品,同法测定,按外标法以峰 面积计算,即得。 78 硫酸沙丁胺醇片 ? 【含量测定】 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测定。 ? 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂;以0.08mol/L磷酸二氢钠溶液 (用磷酸调节pH值至3.10±0.05)-甲醇(85:15)为流动 相;检测波长为276nm。理论板数按硫酸沙丁胺醇 峰计算不低于3000。 ? 测定法 取本品20片,精密称定,研细,精密 称取适量(约相当于沙丁胺醇4mg),置50ml量瓶中, 加流动相适量,振摇使硫酸沙丁胺醇溶解,用流动 相稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液 20μl, 注入液相色谱仪,记录色谱图;另取硫酸沙丁胺醇 对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释 制成每1ml中含96μg的溶液,同法测定。按外标法 以峰面积计算,并将结果与0.8299相乘,即得。 79 谢 谢 80